Набор теста Фуралтадоне (АМОЗ) ЭЛИСА для креветки/мяса/Хепар меда обнаружения

Набор теста Furaltadone (AMOZ) ELISA

Характер продукции

Набор теста ^{™Furaltadone} REAGEN (AMOZ) ELISA обеспечивает конкурсный immunoassay энзима для количественного анализа furaltadone в рыбах, креветке, мясе (цыпленке, говядине, свинине и hepar), яйцах, хоне.

• Речной порог (4 часа), высокое спасение (80 до 105%), и рентабельные методы извлечения для различных образцов.

• Высокая чувствительность (0,05 ng/g или ppb) и низкий предел обнаружения (0,1 ng/g или ppb) для различных образцов.

• Высокая воспроизводимость.

• Быстрый assay ELISA (более менее чем 1 час независимо от количества образцов).

Обзор процедуры

Метод основан на конкурсном колориметрическом assay ELISA. AMOZ-BSA было покрыто в колодцах плиты. В процессе анализа, образец и антитело AMOZ добавлены вместе с вторичным антителом, маркированным с энзимом пероксидазы. Если выпарка AMOZ присутствует в образце, то она состязается для антитела AMOZ, таким образом предотвращающ антитело от вязки к AMOZ-BSA прикрепленной в колодец. Приводя интенсивность цвета, после добавления субстрата HRP (TMB), имеет обратное отношение с концентрацией выпарки AMOZ в образце.

Содержание, хранение и срок годности при хранении набора

Набор теста ^{™Furaltadone} REAGEN (AMOZ) ELISA имеет емкость для 96 определений или испытывать 42 образцов в дубликате (принимая 12 колодца для стандартов). Возвратите все неиспользованные microwells в сумку фольги и заново герметизируйте их с осушителем обеспеченным в первоначальном пакете. Храните набор на 2-8°C*. Срок годности при хранении 12 месяца когда набор как следует хранится.

* если вы не планируете использовать набор для сверх 1 месяца, магазина Antibody#1 и HRP-проспряганного антитела #2 на -20°C или в замораживателе.

Чувствительность (предел обнаружения)

Характерность (перекрестная реактивность)

Требуемые материалы не обеспеченные с набором

читатель плиты 1.Microtiter (450 nm)

2.Incubator

смеситель 3.Tissue (например гомогенизатор Omni TissueMaster)

газ испарителя 4.Rotary или азота

смеситель 5.Vortex (например смеситель вортекса Gneie от VWR)

пипетки 6,10, 20, 100 и 1000 mL

пипетка 7.Multi-channel: 50-300 mL (опционный)

ацетат 8.Ethyl

9.0.1 M K2HPO4

10.n-Hexane (или n-гептан)

NaOH 11.1M

HCL 12.1M

Предупреждения и меры предосторожности

• Стандарты содержат Furaltadone. Ручка с определенной заботой.

• Не используйте набор за сроком годности.

• Не перемешайте реагенты от различных наборов или серии за исключением компонентов с таким же номером детали внутри их сроки годности. АНТИТЕЛА И ПЛИТЫ НАБОР И LOT-SPECIFIC.

• Попробуйте поддерживать температуру лаборатории 20°-25°C (68°-77°F). Ход Avoid assays под или около вентиляционными отверстиями, по мере того как это может причинить чрезмерные охлаждать, топление и/или испарение. Также, не побегите assays в сразу солнечном свете, по мере того как это может причинить избыточное тепло и испарение. Холодные верхние части стенда следует избежать путем устанавливать несколько слоев полотенца бумаги или некоторого другого материала изоляции под плитами assay во время инкубации.

• Убеждайтесь что вы использующ только дистиллирует или деионизированная вода в виду того что качество воды очень важно.

• Капая образцы или реагенты из пипетки в пустую плиту microtiter, установите подсказки пипетки в более низком угле колодца, кашась с пластмассой.

• Инкубации плит assay должны быть приурочены как можно точнее. Последователен при добавлении стандартов к плите assay. Добавьте ваши стандарты сперва и после этого ваши образцы.

• Добавьте стандарты для того чтобы покрыть только в заказе от низкой концентрации к высокой концентрации по мере того как это уменьшит риск компрометировать стандартную кривую.

• Всегда refrigerate плиты в загерметизированных сумках с осушителем для поддержания стабильности. Предотвратите конденсацию от формировать на плитах путем позволять им эквилибрировать к комнатной температуре (20 – 25°C/68 – 77°F) пока в упаковке.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦА

Уверенный что образцы как следует хранится. Вообще, образцы должны быть refrigerated на forno 2-4°C больше чем 1-2 дней. Образцы замораживания к минимум -20°C если им нужно храниться на более длинный период. Замерли образцы можно растаять на temps комнаты (20 – 25°C/68 – 77°F) или в холодильнике перед использованием.

Рыбы

• Смешивание 1 g гомогенизированного образца с 0,5 mL буфера извлечения образца 1X, 3,5 mL дистиллированной воды, 0,5 mL HCl 1 m и 20 mL 50 mM 2-Nitrobenzaldehyde путем vortexing на 30 секунд.

• Инкубируйте на 50°C -55°C на 3 часа. Вортекс образец на 5 секунд каждый час во время инкубации.

• Добавьте 5 mL 0,1 m K2HPO4, 0,4 mL NaOH 1 m и 6 mL этилового эфира уксусной кислоты, вортекс на 2 минуты.

• Центрифуга на 4 000 x g на 5 минут на комнатной температуре (20 – 25°C).

• Передача 3 mL супернатанта этилового эфира уксусной кислоты (соответствие к 0,5 g первоначального образца) в новую пробирку (f избегает более низкого водного слоя! Если загрязнено с более низким слоем, центрифугуйте извлеченный этиловый эфир уксусной кислоты на 5 минут на 4 000 x g снова и получайте верхний органический слой). В случае если эмульсия случилась и верхний слой этилового эфира уксусной кислоты был чем 3 mL, инкубируйте образец в воде - ванне на 3 минуты на 85°C.Use роторный испаритель для того чтобы высушить образец в воде 60-70°C - ванна при пониженном давлении. Альтернативно, образец может быть высушен путем дуть газ в воде 60-70°C - ванна азота.

• Растворите высушенную выпарку в 1 mL н-гексана (или n-гептана).

• Добавьте 1 mL 1 буфера извлечения образцаx, вортекса образец на 2 минуты.

• Центрифугуйте образец на 4 000 x g на 10 минут на комнатной температуре (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Используйте 50mL более низкого водного слоя в колодец для assay.

Примечание: Множитель дилюции: 2. Избегает высокой предпосылки, порекомендованы, что, чтобы растворяющий пустой образец был подготовлен параллельно, старт с уменьшением 3 mL этилового эфира уксусной кислоты к засохлости и продолжается с процедурой по извлечения остатков. Вычтите результат растворяющего контроля от результатов образца.

Креветка /Meat/Hepar

• Смешивание 1 g гомогенизированного образца с буфером извлечения образца 0,5 mL 1X, 3,5 mL дистиллированной воды, 0,5 mL HCl 1 m и 20 mL 50 mM 2-Nitrobenzaldehyde путем vortexing на 30 секунд.

• Инкубируйте at50°C -55°C на 3 часа. Вортекс образец на 5 секунд каждый час во время инкубации.

• Добавьте 5 mL 0,1 m K2HPO4, 0,4 mL NaOH 1 m и 6 mL этилового эфира уксусной кислоты, вортекс на 5 минут.

• Центрифуга на 4 000 x g на 5 минут на комнатной температуре (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Передача 3,0 mL супернатанта этилового эфира уксусной кислоты (соответствие к 0,5 g первоначального образца яйца) в новую пробирку (f избегает более низкого водного слоя! Если загрязнено с более низким слоем, центрифугуйте извлеченный этиловый эфир уксусной кислоты на 5 минут на 4 000 x g снова и получайте верхний органический слой). Используйте роторный испаритель для того чтобы высушить образец в 60-70°C воде - ванна при пониженном давлении. Альтернативно, образец может быть высушен путем дуть газ в воде 60-70°C - ванна азота.

• Растворите высушенную выпарку в 1 mL н-гексана (или n-гептана).

• Добавьте 1 mL буфера и вортекса извлечения образца 1X образец на 2 минуты.

• Центрифугуйте образец на 4 000 x g на 10 минут на комнатной температуре (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Используйте 50 mL более низкого водного слоя в колодец для assay.

Примечание: Множитель дилюции: 2. Избегает высокой предпосылки, порекомендованы, что, чтобы растворяющий пустой образец был подготовлен параллельно, старт с уменьшением 3 mL этилового эфира уксусной кислоты к засохлости и продолжается с процедурой по остатков. Вычтите результат растворяющего контроля от результатов образца.

Яйцо

• Смешивание 1 g образца яйца с 0,5 mL буфера извлечения образца 1X, 3,5 mL дистиллированной воды, 0,5 mL HCl 1 m и 20 mL 50 mM 2-Nitrobenzaldehyde путем vortexing на 2 минуты.

• Инкубируйте на 50°C -55°C на 3 часа. Вортекс образец на 5 секунд каждый час во время инкубации.

• Добавьте 5mL 0,1 m K2HPO4, 0,4 mL NaOH 1 m и 6 mL этилового эфира уксусной кислоты, вортекса 5 минут на максимальной скорости.

• Центрифуга на 4 000 x g на 10 минут на комнатной температуре (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Передача 3,0 mL супернатанта этилового эфира уксусной кислоты (соответствие к 0,5 g первоначального образца меда) в новую пробирку (f избегает более низкого водного слоя! Если загрязнено с более низким слоем, центрифугуйте извлеченный этиловый эфир уксусной кислоты на 5 минут на 4 000 x g снова и получайте верхний органический слой). Используйте роторный испаритель для того чтобы высушить образец в 60-70°C воде - ванна при пониженном давлении. Альтернативно, образец может быть высушен путем дуть газ в воде 60-70°C - ванна азота.

• Растворите высушенную выпарку в 1 mL н-гексана (или n-гептана).

• Добавьте 1 mL 1 буфера и вортекса извлечения образцаx на 2 минуты.

• Центрифугуйте образец на 4 000 x g на 10 минут на комнатной температуре (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Use50 mL более низкого водного слоя для assay.

Примечание: Множитель дилюции: 2. (1) после того как испарение выдержки этилового эфира уксусной кислоты, приводя выпарка совершенно не будет растворено. Однако, скорость восстановления не будет скомпрометирована (>80%). (2) для этой подготовки, мы рекомендуем использовать стандарт 0,5 ng/g или ppb как отрезок со значения для положительных образцов в виду того что отрицательные образцы смогли показать значительные влияния предпосылки (в некоторых случаях между стандартами 0,05 ng/g и 0,15 ng/g).