Furaltadone (AMOZ) ELISA Test Kit For Detection Honey Креветки / мясо / гепарты для выявления меда

Тест-набор для ИФА на фуралтадон (АМОЗ)

Описание продукта

РЕАГЕН^™Набор для иммуноферментного анализа на фуралтадон (AMOZ) обеспечивает конкурентный иммуноферментный анализ для количественного анализа фуралтадона в рыбе, креветках, мясе (курица, говядина, свинина и печень), яйцах, меде.

• Быстрые (4 часа), высокоэффективные (80–105%) и экономически эффективные методы экстракции для различных образцов.

• Высокая чувствительность (0,05 нг/г или ppb) и низкий предел обнаружения (0,1 нг/г или ppb) для различных образцов.

• Высокая воспроизводимость.

• Быстрый ИФА-анализ (менее 1 часа независимо от количества образцов).

Обзор процедуры

Метод основан на конкурентном колориметрическом анализе ELISA. AMOZ-BSA был нанесен в лунки планшета. Во время анализа образец и антитело AMOZ добавляются вместе со вторичным антителом, помеченным ферментом пероксидазой. Если остаток AMOZ присутствует в образце, он будет конкурировать за антитело AMOZ, тем самым предотвращая связывание антитела с AMOZ-BSA, прикрепленным к лунке. Результирующая интенсивность цвета после добавления субстрата HRP (TMB) имеет обратную зависимость от концентрации остатка AMOZ в образце.

Состав набора, хранение и срок годности

РЕАГЕН^™Тест-набор Furaltadone (AMOZ) ELISA рассчитан на 96 определений или тестирование 42 образцов в двух экземплярах (предполагая, что 12 лунок являются стандартами). Верните все неиспользованные микролунки в фольгированный пакет и запечатайте их с помощью осушителя, предоставленного в оригинальной упаковке. Храните набор при температуре 2–8 °C*. Срок годности набора составляет 12 месяцев при правильном хранении.

* Если вы не планируете использовать набор в течение более 1 месяца, храните антитело № 1 и конъюгированное с пероксидазой хрена антитело № 2 при температуре -20 °C или в морозильной камере.

Чувствительность (предел обнаружения)

Специфичность (перекрестная реактивность)

Необходимые материалы, не входящие в комплект

1. Микротитрационный планшетный ридер (450 нм)

2.Инкубатор

3. Смеситель тканей (например, гомогенизатор Omni TissueMaster)

4. Роторный испаритель или азотный газ

5. Вихревой смеситель (например, вихревой смеситель Gneie от VWR)

6.Пипетки на 10, 20, 100 и 1000 мл

7.Многоканальная пипетка: 50-300 мл (опционально)

8.Этилацетат

9.0.1 М K2HPO4

10.н-Гексан (или н-Гептан)

11,1 М NaOH

12,1 млн HCL

Предупреждения и меры предосторожности

• Стандарты содержат фуральтадон. Обращаться с особой осторожностью.

• Не используйте набор по истечении срока годности.

• Не смешивайте реагенты из разных наборов или партий, за исключением компонентов с одинаковыми номерами деталей в пределах их сроков годности. АНТИТЕЛА И ПЛАНШЕТЫ СПЕЦИФИЧНЫ ДЛЯ НАБОРА И ПАРТИИ.

• Постарайтесь поддерживать температуру в лаборатории 20–25 °C (68–77 °F). Избегайте проведения анализов под вентиляционными отверстиями или около них, так как это может привести к чрезмерному охлаждению, нагреванию и/или испарению. Также не проводите анализы под прямыми солнечными лучами, так как это может привести к чрезмерному нагреванию и испарению. Следует избегать холодных поверхностей столов, помещая несколько слоев бумажных полотенец или другого изоляционного материала под планшеты для анализа во время инкубации.

• Убедитесь, что вы используете только дистиллированную или деионизированную воду, поскольку качество воды очень важно.

• При внесении образцов или реагентов в пустой микротитрационный планшет поместите наконечники пипетки в нижний угол лунки, чтобы они соприкасались с пластиком.

• Инкубации аналитических планшетов должны быть рассчитаны по времени как можно точнее. Будьте последовательны при добавлении стандартов в аналитический планшет. Сначала добавьте стандарты, а затем образцы.

• Добавляйте стандарты в чашку только в порядке от низкой концентрации к высокой, так как это сведет к минимуму риск нарушения стандартной кривой.

• Всегда охлаждайте пластины в герметичных пакетах с осушителем для сохранения стабильности. Предотвращайте образование конденсата на пластинах, давая им достичь комнатной температуры (20–25°C / 68–77°F) в упаковке.

ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

Убедитесь, что образцы хранятся надлежащим образом. Как правило, образцы следует хранить в холодильнике при температуре 2–4 °C не более 1–2 дней. Заморозьте образцы до температуры не ниже -20 °C, если их необходимо хранить в течение более длительного периода. Замороженные образцы можно разморозить при комнатной температуре (20–25 °C / 68–77 °F) или в холодильнике перед использованием.

Рыба

• Смешайте 1 г гомогенизированного образца с 0,5 мл 1X буфера для экстракции образца, 3,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 1 М HCl и 20 мл 50 мМ 2-нитробензальдегида, встряхивая в течение 30 секунд.

• Инкубируйте при температуре 50°C -55°C в течение 3 часов. Встряхивайте образец в течение 5 секунд каждый час во время инкубации.

• Добавьте 5 мл 0,1 М K2HPO4, 0,4 мл 1 М NaOH и 6 мл этилацетата, перемешивайте в течение 2 минут.

• Центрифугируйте при 4000 g в течение 5 минут при комнатной температуре (20–25 °C).

• Перенесите 3 мл супернатанта этилацетата (что соответствует 0,5 г исходного образца) в новую пробирку (F Избегайте нижнего водного слоя! Если загрязнен нижний слой, центрифугируйте извлеченный этилацетат в течение 5 минут при 4000 xg снова и получите верхний органический слой). В случае, если произошла эмульсия и верхний слой этилацетата был менее 3 мл, инкубируйте образец в водяной бане в течение 3 минут при 85 °C. Используйте роторный испаритель, чтобы высушить образец в водяной бане с температурой 60-70 °C при пониженном давлении. В качестве альтернативы образец можно высушить, продувая газообразный азот в водяной бане с температурой 60-70 °C.

• Растворите высушенный остаток в 1 мл н-гексана (или н-гептана).

• Добавьте 1 мл1ХБуфер для экстракции образца, встряхивайте образец в течение 2 минут.

• Центрифугируйте образец при 4000 g в течение 10 минут при комнатной температуре (20–25°C / 68–77°F).

• Для анализа используйте 50 мл нижнего водного слоя на лунку.

Примечание:Фактор разбавления: 2. Чтобы избежать высокого фона, рекомендуется параллельно готовить образец холостого раствора растворителя, начиная с восстановления 3 мл этилацетата досуха и продолжая оставшейся процедурой экстракции. Вычтите результат контроля растворителя из результатов образца.

Креветка/Мясо/Печень

• Смешайте 1 г гомогенизированного образца с 0,5 мл 1X буфера для экстракции образца, 3,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 1 М HCl и 20 мл 50 мМ 2-нитробензальдегида, встряхивая в течение 30 секунд.

• Инкубируйте при температуре 50°C -55°C в течение 3 часов. Встряхивайте образец в течение 5 секунд каждый час во время инкубации.

• Добавьте 5 мл 0,1 М K2HPO4, 0,4 мл 1 М NaOH и 6 мл этилацетата, перемешивайте в течение 5 минут.

• Центрифугируйте при 4000 g в течение 5 минут при комнатной температуре (20–25°C / 68–77°F).

• Перенесите 3,0 мл этилацетатного супернатанта (что соответствует 0,5 г исходного образца яйца) в новую пробирку (F Избегайте нижнего водного слоя! Если загрязнен нижний слой, центрифугируйте извлеченный этилацетат в течение 5 минут при 4000 xg снова и получите верхний органический слой). Используйте роторный испаритель для сушки образца в водяной бане с температурой 60-70°C при пониженном давлении. В качестве альтернативы образец можно высушить, продувая газообразный азот в водяной бане с температурой 60-70°C.

• Растворите высушенный остаток в 1 мл н-гексана (или н-гептана).

• Добавьте 1 мл1XДобавьте буфер для экстракции образца и перемешивайте образец в течение 2 минут.

• Центрифугируйте образец при 4000 g в течение 10 минут при комнатной температуре (20–25°C / 68–77°F).

• Для анализа используйте 50 мл нижнего водного слоя на лунку.

Примечание: Фактор разбавления: 2. Чтобы избежать высокого фона, рекомендуется параллельно готовить образец холостого раствора растворителя, начиная с восстановления 3 мл этилацетата досуха и продолжая остальной процедурой. Вычтите результат контроля растворителя из результатов образца.

Яйцо

• Смешайте 1 г образца яйца с 0,5 мл 1X буфера для экстракции образца, 3,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 1 М HCl и 20 мл 50 мМ 2-нитробензальдегида, встряхивая в течение 2 минут.

• Инкубируйте при температуре 50°C -55°C в течение 3 часов. Встряхивайте образец в течение 5 секунд каждый час во время инкубации.

• Добавьте 5 мл 0,1 М K2HPO4, 0,4 мл 1 М NaOH и 6 мл этилацетата, перемешивайте в течение 5 минут на максимальной скорости.

• Центрифугируйте при 4000 g в течение 10 минут при комнатной температуре (20–25°C / 68–77°F).

• Перенесите 3,0 мл этилацетатного супернатанта (что соответствует 0,5 г исходного образца меда) в новую пробирку (F Избегайте нижнего водного слоя! Если загрязнен нижним слоем, центрифугируйте извлеченный этилацетат в течение 5 минут при 4000 xg снова и получите верхний органический слой). Используйте роторный испаритель для сушки образца в водяной бане с температурой 60-70°C при пониженном давлении. В качестве альтернативы образец можно высушить, продувая газообразный азот в водяной бане с температурой 60-70°C.

• Растворите высушенный остаток в 1 мл н-гексана (или н-гептана).

• Добавьте 1 мл1ХДобавьте буфер для экстракции образца и перемешивайте в течение 2 минут.

• Центрифугируйте образец при 4000 g в течение 10 минут при комнатной температуре (20–25°C / 68–77°F).

• Для анализа используйте 50 мл нижнего водного слоя.

Примечание: Фактор разбавления: 2. (1) После испарения экстракта этилацетата полученный остаток не растворяется полностью. Однако скорость восстановления не будет снижена (>80%). (2) Для этого препарата мы рекомендуем использовать стандарт 0,5 нг/г или ppb в качестве порогового значения для положительных образцов, поскольку отрицательные образцы могут показывать значительные фоновые эффекты (в некоторых случаях между стандартами 0,05 нг/г и 0,15 нг/г).